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您檢測分析的樣品往往體積非常小、移動速度非??旎驑O易受光漂白作用的影響?;蛘?,同時兼具上述三個特征。為能從活細胞或其它采用微弱光信號標記的樣品中獲取無偏差的數(shù)據(jù),則要求顯微儀器擁有更高的靈敏度、更出色的分辨率或更快的速度。發(fā)射光的每一個光子都十分寶貴。
現(xiàn)在,您可以使用含有任意標記的多色樣品來獲取前所未有的圖像品質(zhì)。在樣品最佳采集方案的選擇上,Airyscan 技術(shù)將助您一臂之力:在 x/y/z 三個維度上獲得超出以往 1.7 倍的高分辨率,并實現(xiàn)縮小 5 倍的共聚焦體積?;蛘咦岇`敏度超出所有傳統(tǒng)共聚焦系統(tǒng)的極限?;蛘咄ㄟ^提高信噪比來加快圖像采集速度。一切都取決于您。
Airyscan 開啟共聚焦成像新時代
執(zhí)行定量成像
提高工作流程的效率
傳統(tǒng)共聚焦顯微鏡以單個光斑照亮樣品,用以檢測發(fā)射的熒光信號。針孔阻止非焦平面的發(fā)射光穿過,其大小決定了到達探測器的艾里圖樣數(shù)量。您可以減小針孔大小來提高分辨率,由于通過的有用激發(fā)光變少,從而導(dǎo)致信噪比顯著降低。蔡司借助 Airyscan 技術(shù)引入全新理念。不在針孔處限制光通量,而是直接使用一個 32 通道平面探測器同時收集一個艾里圖樣的所有光。每個探測器元件可被視作非常小的單個針孔。只要了解光路和每個艾里圖樣的空間分布,便能實現(xiàn)非常高效的光學(xué)成像:您現(xiàn)在可以使用物鏡收集到的所有光子了。
是否使用樣品的更多信息來提高信噪比、分辨率或速度,一切都取決于您。利用可選的虛擬針孔模式(Virtual Pinhole Mode),甚至能夠在完成采集后選擇適合于應(yīng)用的最佳針孔大小。
為能在動態(tài)的細胞和亞細胞過程中完整解析標記蛋白質(zhì)的運動,常常需要以約每秒 10 幀的速率成像。現(xiàn)在,您可以借助 LSM 880 以高達每秒 13 幀的速率拍攝 512 x 512 像素分辨率的圖像。
LSM 880 能夠連續(xù)監(jiān)測和校正掃描器的位置,以確保穩(wěn)定的觀察視野及在整個觀察視野內(nèi)保持每個像素相同的積分時間。線性掃描是定量和關(guān)聯(lián)成像的基礎(chǔ)前提條件,它可以在整個掃描區(qū)域內(nèi)(包含待操作的感興趣區(qū)域)實現(xiàn)恒定信噪比,以及使樣品均勻地暴露在照明激光下。與傳統(tǒng)正弦掃描共聚焦技術(shù)不同,LSM 880 使用超過 80% 的掃描時間進行數(shù)據(jù)采集。這就意味著,在一定的幀率上擁有更長的像素積分時間,從而使信噪比提升了 29%。
運用多個標記分析不同細胞或亞細胞結(jié)構(gòu)之間的相互作用,通過同時記錄它們的強度可以獲得最高定時精度及縮短成像時間。LSM 880 能讓您僅在單次掃描中借助 32 個通道,以每秒 5 幀的速率和 512 x 512 像素分辨率采集整個光譜及所有標記。
配置 10 個通道用于多通道光譜成像,然后再增加透射式探測器。您現(xiàn)在可以在單次掃描中對所有染料成像并利用輔助傾斜照明進行襯度成像。既保護了樣品,又節(jié)省了時間。
尤其是在要求嚴苛的多光子實驗中,您將從這一基本功能中大大獲益:并行讀出多達 12個非掃描檢測器信息